潔淨室（區）沉降菌的（de）監測（全麵）

一、監（jiān）測依據
1、《中華人民共和國國家標準（醫藥工業潔淨（jìng）室（shì）（區）沉降菌的測試方法）》GB/T 16294-2010。
2、《藥品生（shēng）產質量管理規範》（2010年修訂）。
二、檢測原理
沉降（jiàng）菌的測試方法采用沉降法，即通過自（zì）然沉降原（yuán）理收集在空氣中的生物粒子於培（péi）養基平皿，經若幹時間（jiān），在適宜的條件下讓其繁殖到可見的菌落進行計數（shù），以平板培養皿中的菌落數來判定潔淨（jìng）環境內的活（huó）微生物數，並以此來評定潔淨室（shì）（區）的潔淨度。
三、監測要求
1、測試條件（jiàn）
（1）溫度和相對濕度：潔淨室（區）的（de）溫度（dù）和相對濕度應與其（qí）生產及（jí）工藝要求相適應（無特殊要求時，溫度在18～26℃，相對濕度在（zài）45%～65%為宜），同時還應滿足測試儀器的使用範圍。
（2）室內壓差（chà）、送（sòng）風量或風速應符（fú）合要求。
（3）高效過（guò）濾器的泄漏測試應符合要求（qiú）。
2、測試狀態
（1）沉降菌測試前，被測試潔淨室（區）的溫度、濕度須達到規定的要（yào）求，靜壓差必須控製在規定（dìng）值內。
（2）沉降菌測（cè）試前，被測（cè）試潔淨室（區）已經過消毒。
（3）測試狀態有靜態（tài）和動態兩種，測試狀態的選擇必須符合生產的要求，並在報告中（zhōng）注明測試（shì）狀態。
3、測試時間
（1）靜態a：單向流潔淨室（區）在空氣（qì）淨化係統正常運（yùn）行10min後開始，非單向（xiàng）流潔淨室（區）在空氣淨化係統正常運行30min後開始（shǐ）。
（2）靜態b：單向流（liú）潔淨室（區）在生產操作人（rén）員撤離現場自（zì）淨10min後開始；非單向流潔淨室（區）在生產操作人員撤離現場，自淨20min後開始。
（3）在動態（tài）測試時，則須記錄生產開始的時間以及測試時間。
備注：靜態a指潔淨室（區）在空（kōng）氣淨化係統已經安裝完畢且功能完備的情況下，生產工藝設備已安裝、潔淨室（區）內沒有生（shēng）產人（rén）員的狀態。
靜態b指潔淨室（區）在生產操作全部結束，生產操作人員撤離現場並經過20min自淨（jìng）後（hòu）的狀態。
四、采樣
1、最少采樣點數（shù）目的確定
根據（jù）潔（jié）淨室（區）麵積大小和潔（jié）淨（jìng）級別要求不同（tóng）確定最少采（cǎi）樣點數目，按（àn）國家標（biāo）準要求（qiú），采樣在滿足最少采（cǎi）樣點數的同時還（hái）應滿足（zú）最少培養皿（mǐn）數。不同（tóng）級別的潔（jié）淨室（區）最少采樣點數可（kě）按下表確（què）定：

備注：表中的麵積對於單向流潔淨室指的是送（sòng）風麵積，對於非單向流潔淨室指的是（shì）房間麵積。
最少培養皿數按下表確（què）定：

2、采樣點（diǎn）的布置
（1）工作區測試點位置離地0.8～1.5m。
（2）可在關鍵設（shè）備或關鍵工作活（huó）動（dòng）範圍處增加測試點。
（3）采樣點的布置力求均勻，避免采樣點在某局部區域過於集中或稀疏。
3、測試步驟
（1）測試前，用75%乙醇棉球或0.1%新（xīn）潔（jié）爾滅溶液擦拭培養皿外（wài）表麵後，將培養皿放入傳遞窗內殺菌至少30min。
（2）將已製備好（hǎo）的培（péi）養基平皿麵朝上按采樣點布（bù）置圖由內至（zhì）外逐個放置，逐（zhú）一打開皿蓋，把培養皿蓋朝下斜（xié）靠在培養皿邊緣，使培養皿表麵暴露在空氣中1h以上，但不大於4h，再講培養皿蓋好後倒置。
（3）靜態測試時，培養皿（mǐn）暴露時間（jiān）為30min以上；動態測試時，單個沉（chén）降碟的暴露時間（jiān）可以（yǐ）少於（yú）4h，同一（yī）位置可使用多（duō）個沉降碟連續進行監測，並積累計數（shù），直至監測時間累計達到4h。
采樣注意事項：
（1）測試人員必須穿（chuān）戴符合環境潔淨（jìng）度級別的工作服。
（2）靜態測試（shì）時（shí），室內測試人員不（bú）得多於2人。
（3）對於單向流潔淨室（區）或送風口，采樣器采樣（yàng）口朝向應正對氣（qì）流方向；對於非單（dān）向（xiàng）流潔淨室（shì）（區），采樣口向上（shàng）。
（4）布置（zhì）采樣點時，至少（shǎo）應盡量避開塵粒較集中的回風口。
（5）采樣時，測試人員應站在（zài）采樣口的下風側，並盡量少走動。
（6）應采取一（yī）切措施防止采樣過程的汙染和其它（tā）可能對樣本的汙染。
五、培養
（1）全部采樣結束（shù）後，將培養皿倒置於恒溫培養箱中培養，注（zhù）意觀察菌落生長情況（kuàng）。
（2）采用大豆酪蛋白瓊脂培養基配製的培養皿經采樣後，在30～35℃培養箱中培養（yǎng），時（shí）間不少於（yú）2天；采用沙氏培養基配製的培養基經采樣（yàng）後，在20～25℃培養箱（xiāng）中培養（yǎng），時間不少於5天。
（3）每批培養（yǎng）基應有對照試驗，檢驗培養基本（běn）身是（shì）否汙染。可每（měi）批選定3隻培養皿作對照培養（yǎng）。
六、菌落計數
（1）用肉眼對培養皿上所有的菌落直接計數、標（biāo）記或在（zài）菌落計數器上點計，然後用5～10倍（bèi）放大鏡（jìng）檢查有無（wú）遺漏。
（2）若培養皿上（shàng）有2個或2個以上的菌落重疊，可（kě）分辨時仍以（yǐ）2個或2個以上菌落（luò）計數，不能分辨時，以（yǐ）1個菌落計數。
七、計算結果
用計數方法得出各個培養皿的菌落數之和，每個（gè）檢測點的沉降菌平均菌落數（shù）用下式計算：

式中，為平均菌落數（shù）
    M1為1號培養皿菌落數
    M2為2號培養皿菌（jun1）落數
    Mn為n號培養皿菌落數
    n為（wéi）培養皿總數
八、結果與判定
每個測點的沉降（jiàng）菌平（píng）均菌落數必須低於所選定評定標（biāo）準中的界限。在靜態測試時，若某測（cè）點的沉降菌平均菌落數（shù）超過評定標準，則應重新采樣兩次（cì），兩次測試（shì）結果均合格才能判為符合。不同級別潔淨室（區）沉降菌技術指標見下（xià）表所示（shì）：

九、記錄
潔（jié）淨室（區（qū））沉降菌的監（jiān）測應填寫記錄（lù），監測報告（gào）應包含以下內容：
（1）測試者的名稱和（hé）地址，測試日期。
（2）測試依據。
（3）被測潔淨室（區）的平麵布（bù）置。
（4）有關（guān）測（cè）試儀器及其測試方法的描述。
（5）測試結果，包括所有統計計算資料。