四級生物安全實驗室要求規範

按照BSL-4標準建（jiàn）造的實驗（yàn）室，也稱為高度實驗室生物安全。實驗室為獨立的建築物，或在建築物（wù）內（nèi）一切其它區域相隔離的可控製的區域。為防止微生物傳播（bō）和汙染環（huán）境，BSL-4實驗室必須實施（shī）特殊的（de）設計和工藝。在此沒有提到的BSL-3要求（qiú）的（de）各條款在BSL-4中（zhōng）都應做到。其具（jù）體的（de）標準（zhǔn）微生物操（cāo）作（zuò）、特殊（shū）操作、安全設備和實驗室（shì）設施要求如下（xià）：
1、標準（zhǔn）操作
（1）限製進入實驗室的人員數量。
（2）製定安全操作利器的規程。
（3）減少或（huò）避免氣溶膠發生（shēng）。
（4）工作台麵每天至少消毒一次，任何（hé）濺出物（wù）都要及時消毒。
（5）一切廢棄物（wù）在處理前要高（gāo）壓滅菌。
（6）昆蟲和齧齒類動物控製按有關規定（dìng）執行。
（7）嚴格控製菌（jun1）、毒種（見前）。
2、特殊操作
（1）人（rén）員進入
隻有工作需（xū）要的人員和設備運轉需要的人員經過係統的生（shēng）物安全培訓（xùn），並經過（guò）批準後方能（néng）進入實（shí）驗室。負（fù）責人或監督人有責任慎重處（chù）理每（měi）一個情況，確定進入實驗（yàn）室工作的人員。采用門禁係統限製人員進入（rù）。進入人員由實驗室負責人、安全控製員管理。人員進入前要（yào）告知他們潛在的生物危險，教（jiāo）會他們使用安全裝置。工作人員要（yào）遵守實驗室進出程序。製定（dìng）應對（duì）緊急事（shì）件切實可行的對策和預案。
（2）危害（hài）警告
當（dāng）實驗（yàn）室內有傳染性材料或感染動物時，在（zài）所有（yǒu）的（de）入口門上展示危險（xiǎn）標（biāo）誌和普（pǔ）遍防（fáng）禦信號，說明微生物的種類、實驗室負責人和其他責任人的名（míng）單和進入此區域特殊的要求。
（3）負責人職責
實驗室負責人有責（zé）任保證，在BSL-4內工作之前，所有工作人員已經高度熟練掌握標準微生物操作技術、特殊操作和設施運轉的特殊技能（néng）。這包括實驗室負責人和具有豐富的安全微生物操作和工作經驗專家培（péi）訓時所提供的內容和安全（quán）委員會的要求。
（4）免疫接種
工作人員要接受（shòu）試驗（yàn）病（bìng）原體或實驗室內潛在病原微生物的免疫注射（shè）。
（a）血清學監督：對實驗室所有工作人（rén）員和其他有感染危（wēi）險的（de）人員采集本（běn）底（dǐ）血清並保存，再（zài）根據操作情況和實驗室功能不定期血樣采（cǎi）集。進行（háng）血（xuè）清學監督（dū）。對致病微生物抗體評價方（fāng）法要注（zhù）意適用性（xìng）。項目進行中，要保證每（měi）個階段血清樣本的檢測，並把結果通知本（běn）人。
（b）安全手冊：製定（dìng）生物（wù）安全手（shǒu）冊。告知工作人員特殊（shū）的生物危險，要求他們認真閱讀並在實際工作（zuò）當中嚴格執行。
（c）技術（shù）培訓：工（gōng）作人員必須經過操作zui危險病原微生物的全麵培訓，建立普遍防禦意識，學會對暴（bào）露危害的評價方法，學習物理防護設備和設施的設計原理和特（tè）點。每（měi）年訓練一次，規程一旦修改（gǎi）要增加訓（xùn）練次數。由對這些（xiē）病（bìng）原微生物工作（zuò）受過嚴格訓練和具有豐富工作經驗的專家或安全委員會指導、監督（dū）進行工（gōng）作。
（d）緊急通道隻（zhī）有在（zài）緊急情況下才能經過氣閘門進出實驗室。實（shí）驗室內要有（yǒu）緊急通道的明顯標識。
（e）在安全櫃型實驗室中，工作人員的衣服在外更衣室脫下保存。穿上全套的實驗服裝（包括外衣、褲子、內衣或（huò）者連衣褲、鞋、手套）後進入。在離開實驗室進入淋浴間之前，在內更衣室脫下實（shí）驗服裝。服裝洗前應高壓滅菌。在防護服型（xíng）實驗室中，工作人員必須（xū）穿正壓防護服方可進入。離開時，必須進入消毒淋浴間消毒。
（f）實驗材料和用品要通過雙扉高壓（yā）滅菌器、熏蒸消毒室（shì）或傳遞窗送入，每次使用前後對這些傳遞室進行適當消毒。
（g）對利器，包括針頭、注射器、玻璃（lí）片、吸管、毛吸（xī）管和解剖刀，必須采取高度（dù）有效的（de）防範措施。盡量不使用針頭、注射器和其它銳利的器（qì）具。隻有在必要時，如實質器官的注射、靜脈（mò）切開或從動物體內（nèi）和瓶子（zǐ）裏吸取液體時才能使用，盡（jìn）量用塑料製品代替玻璃製品。在注射和抽取傳染性材料時，隻能使用鎖定針頭的或一次性的（de）注射器（針頭與注射器一體的）。使用過的針頭在處理之前，不能折彎、折（shé）斷、破損，要精心操作，不要蓋上原來的針頭帽；放在固定方便且不會刺破的（de）用於處理利器的（de）容器裏。不能處理的利器（qì），必須放在器壁堅硬的容器內，運輸到消毒區，高（gāo）壓（yā）消毒滅菌（jun1）。可以使用套管針管和套管針（zhēn）頭、無針頭注射器和其（qí）它安全器具。破損的（de）玻（bō）璃不能用手（shǒu）直接操作，必須用機械的（de）方法清除，如刷（shuā）子、簸萁、夾子和鑷子。盛汙染針（zhēn）頭、銳利器具、碎玻璃等，在處理前一律消（xiāo）毒，消毒後處理按照（zhào）國家或地方的有關規（guī）定實施。
（h）從BSL-4拿出活的或原封不動的（de）材料時，先將其（qí）放在堅固密封的一級容器內，再（zài）密封在不能破損的二級容器裏，經過消毒劑浸泡或消（xiāo）毒熏蒸（zhēng）後通（tōng）過氣閘取出。
（i）除活體或原封不動的生物（wù）材料以外的物（wù）品，除非經過消毒滅菌，否則不能從BSL-4拿出。不耐高（gāo）熱和蒸汽的器具物品可在消毒通（tōng）道或（huò）小室內用（yòng）熏（xūn）蒸消毒。
（j）完成傳染性材料工作之後，特別是（shì）有傳染性（xìng）材料溢出、濺出或汙染時，都要嚴格*地滅菌。實驗室（shì）內儀（yí）器要進行常規消毒。
（k）傳染性材料濺出的消毒清潔工作，由適宜的專業（yè）人員進行。並（bìng）將事故（gù）的經過（guò）在（zài）實（shí）驗室內公示。
（l）建立報告實（shí）驗室暴露事故、雇員缺勤製度和係統，以便對與實驗室潛在危險相關（guān）的疾病（bìng）進行醫學監督。對該係統要（yào）建造一個病房或觀察（chá）室，以便需要時，檢疫、隔離、治療與實驗室相（xiàng）關（guān）的病人。
（m）與實驗無關的物品（植物、動物和（hé）衣物）不（bú）許進入實驗室。
3、安全設備（初（chū）級防護（hù）屏障）
在設施汙染和半汙染（rǎn）工作區（qū）域內的一切操作都應在Ⅲ級生物安全櫃內進行。如工作人員穿著（zhe）具有生命（mìng）支持通風係統（tǒng）的正壓（yā）防護服，可在Ⅱ級（jí）生物安全櫃內進行實驗操（cāo）作。
4、實驗室設施（次級防護屏障）
BSL-4實驗室有兩種類型：安全櫃（guì）型，即所有病原微生物的操（cāo）作（zuò）均在Ⅲ級生物安全櫃內或（huò）隔離器進行；防（fáng）護（hù）服型，即工作人員（yuán）穿正壓防護服工作，操（cāo）作可在Ⅱ級生物安全（quán）櫃內進行。也可以（yǐ）在同一設施內穿正壓防護服，並使用Ⅲ級生物安（ān）全櫃。
（1）安全（quán）櫃型
BSL-4建築物或獨立，或在係統建築中由一個清潔區（qū）或隔（gé）牆把它與其它區域隔離開。中心實驗室（汙染區）裝有Ⅲ級生物安全櫃，實驗室周圍（wéi）為足夠寬的隔離帶，如環形走廊（半汙染區）。從隔離帶進出實驗室必須通過一個緩衝間。在汙（wū）染區和半汙（wū）染區（qū）之間，安裝兩台（tái）以上生物安全型高壓蒸汽滅菌器（qì）（一次滅菌（jun1）），互為備用。外（wài）更衣室（清潔區）與（yǔ）內更衣室（半汙染（rǎn）區）由淋浴間（清潔區）隔開，人員（yuán）進出（chū）經過（guò）淋浴間。在清潔（jié）區與半汙染區之間設置一個通風的雙門（mén）傳遞通道，為不可通過更衣室（shì）進入實驗室的實驗材料、實驗（yàn）用品或儀（yí）器通過物（wù）理屏障時提供（gòng）通道和消毒。在清潔區與半（bàn）汙染（rǎn）區之間同樣安置（zhì）一台生（shēng）物安（ān）全型高壓滅（miè）菌器，用於二次消毒。每天工作（zuò）開始之前，檢（jiǎn）查（chá）所有物理防護參（cān）數（如壓差）。
實驗區的牆、地和天棚整體密封，便於熏（xūn）蒸消毒。內表（biǎo）麵耐水和化學製劑、便於消（xiāo）毒。實驗區任何（hé）液體必（bì）須（xū）排放到有消毒裝置的儲液罐，經過有效滅菌達（dá）標排放。通風口和在線管道都要安（ān）裝HEPA過濾器。工作台麵不滲（shèn）水，耐中等熱、有機溶劑、酸、堿和常用消毒劑的腐蝕。
實驗室用具事（shì）先設計，便於安放穩妥和使用，彼此留有一定空（kōng）間便於清潔衛生，桌椅表麵易於消毒。內外（wài）更（gèng）衣室和實（shí）驗室進出門附近安裝（zhuāng）非手（shǒu）動（dòng）或（huò）自動開關的洗手池。排（pái）風經過2個串連的HEPA過濾，送、排風過（guò）濾器安裝應便於消毒和更（gèng）換。供水、供氣均安裝防止回流的裝置加以（yǐ）保護。如果（guǒ）提供水源（消防噴槍），其開關應（yīng）該是安裝（zhuāng）在實（shí）驗室外麵走廊裏，開關（guān）自動或（huò）非手動。此（cǐ）係統與實驗（yàn）室區域供水分配係統分開（kāi），配備（bèi）防止回流裝置。實驗室進出門自動鎖閉（bì）。實驗室內所有窗戶都必須（xū）是封閉窗。從Ⅲ級安全櫃和實驗室傳出的材料必須經雙扉高壓滅菌器滅菌。滅菌器與周圍物理屏障的牆之間要密封。滅菌器的門自動連鎖控製，以保證隻有在滅菌過程（chéng）全部完成後才能開啟（qǐ）外門。從Ⅲ級安全櫃或實驗室內要拿出的（de）材料（liào）和儀器，不能用高壓滅菌消毒的要通過液體浸泡消毒、氣體熏蒸消毒或同等效果的消毒裝置進行（háng）消毒和傳遞。來自內更衣室（包括廁所）和實驗室內的洗手、地漏、高壓滅菌器的廢水以及其它廢水，在排入公共下水之前，都要（yào）使用可靠的方法消毒（熱處理比較合適）。淋浴和清潔區一側廁所的廢水不需特殊處理就可排入公共下水。所用廢水消毒方法必須具有物理學和生物學的（de）監測措施和法規確（què）認。
非（fēi）循環的負（fù）壓通風（fēng）係統，供、排風（fēng）係統應采用壓力無關裝（zhuāng）置保（bǎo）持動態平衡，保證氣流從zui低（dī）危險區（qū）向zui高危險區的方向流（liú）動。對相鄰區域的壓差或氣（qì）流方向（xiàng）進行監測，能（néng）進行係統聲光報（bào）警。應安裝一套能指示和確認（rèn）實驗（yàn）室壓差、適用（yòng）而可視（shì）的氣壓監測裝置，其顯示部分安裝在外更衣室的進口處（chù）。Ⅲ級生物安全櫃與排風係統相連。
實驗室的供排氣都要經過HEPA過濾。為了縮短工作（zuò）管道潛在的汙（wū）染，HEPA盡可能安裝在靠近工作的地方。所有HEPA每年均須檢測一次，同時在靠近HEPA的地方應安裝（zhuāng）零泄露氣密閥，便於過濾器安裝與（yǔ）消毒更換。HEPA上遊安裝預過濾器可延長其使用壽命。
安全櫃型生物安全（quán）水（shuǐ）平Ⅳ級實驗室的設計（jì）和操作程序是指令性的。實驗室必須經過檢測、鑒定和驗收。隻有合乎設計要求和運行標準的才能啟用。實（shí）驗室的驗收或年檢應（yīng）參考ISO10648標準檢測方（fāng）法進（jìn）行密封性測試，其檢測壓（yā）力不低於（yú）500Pa，半小時的（de）小時泄（xiè）漏率不超過10%，以保證維護結構的可靠（kào）性。實驗室每年必須檢（jiǎn）測一次，確認合乎（hū）設計和（hé）運行參數的要求，才能繼續運（yùn）行（háng）。實驗室（shì）內（nèi）外應有適合的通訊設施（shī）（、傳真、計算機等），進行無紙化操作。
（2）防護服型
BSL-4建築物獨立，或在係（xì）統建築中由一個清（qīng）潔區或（huò）隔牆把它與建（jiàn）築物其（qí）它區域隔開。實驗室房間的安排與安全櫃型基本相同。不（bú）同的是在進入實驗室（可用Ⅱ級生物（wù）安全櫃代替Ⅲ級生物安全櫃）之前要穿上有生命支持係統的正壓（yā）防護服。生命支持係統所供氣體應（yīng）滿足（zú）可呼吸空氣生產標準，同時應增加緊急排風設施及配有備用電源。進入BSL-4實驗室之前要設置（zhì）一個更衣和消毒（dú）區（設在實驗室的一角或環形走廊內側）。工作人員離開此區之（zhī）前應在消毒室對防護服表麵進行藥物噴淋和熏蒸，時間不短於5分（fèn）鍾。備用電（diàn）源，在停電時應能夠保證排風、生命支持係統、警鈴、燈光、進出控（kòng）製和生物安全櫃的應急工作（zuò）。所有通向實驗區、消（xiāo）毒淋浴室、氣閘的空隙都要封閉（bì）。每天（tiān）實驗開始之前，要完成對所有物（wù）理防護參（cān）數（如壓差等）和正壓防護服的檢測，以保證實驗室安全運行。在實驗區跨牆安裝雙扉高（gāo）壓滅菌器，對從實驗區拿出的廢棄物進行一次消毒。高壓（yā）滅菌器與物理防護的（de）壁板間要密閉。
設置渡槽、熏蒸消毒傳遞小室（shì）（櫃），供不能通過更衣室進入實驗區的實驗材料、用品或（huò）儀器的消毒和傳遞使用。這些設施還能用於不（bú）能高壓的（de）材料、用品和儀器安全地取出。在清潔區與半汙（wū）染（rǎn）區之間同樣安置一（yī）台雙（shuāng）扉生物安（ān）全型高壓滅菌器，用於二次消毒。實驗區的牆、地（dì）和天棚整體密封，便於熏蒸消毒。內表麵（miàn）耐水和化學製劑、便於消毒。實驗（yàn）區任（rèn）何液體必須排放到有消毒裝（zhuāng）置的儲液（yè）罐，經（jīng）過有效（xiào）滅菌達標排放。通風口和在線管道都要安裝HEPA過濾器。實驗區內（nèi）部附屬設施，如（rú）燈（dēng）的固定、空氣管道、功能管道等的安排盡可能減少水平表（biǎo）麵麵積。工作台麵不滲水，中等耐熱、抗有機（jī）溶劑、酸、堿和常用消毒劑的腐蝕。
實驗用具要簡單、分體、適用、牢（láo）固（gù），不（bú）選用多孔材（cái）料。桌、櫃、儀器之間保持一（yī）定空間，便於清潔和（hé）消毒。實（shí）驗用椅和其它（tā）用具的表麵應易於消毒。實驗區（qū）、內外更衣室的洗手池設非（fēi）手（shǒu）動開（kāi）關。中央真空係統設在實驗區內，在線HEPA過濾器靠近每一個使用（yòng）點或開關。過濾器安裝便於消毒和更換。其它進入實驗區的供水、供氣由防止回（huí）流裝置加以控製。
實（shí）驗區的門采用門禁係（xì）統（tǒng）。消毒淋浴（yù）、氣閘室的內外門（mén）連鎖。來自汙染區內的洗手池、地漏、滅菌器和其它來源的廢水（shuǐ）必須排放到有消毒裝置的儲液（yè）罐，經過有效滅菌達標排放。來自淋浴（yù）和（hé）廁（cè）所的廢水經處理後排入下水道。所用的廢水消毒方（fāng）法的效果要有物理學和生物學的證（zhèng）據。
全新（xīn）風通風（fēng）係統。供、排風係（xì）統應采用壓力（lì）無關（guān）裝置保持動態平衡，保證氣流從zui低危險區向zui高（gāo）危險區的流動。對相鄰區域的壓差或氣流方向進行監測，能（néng）進（jìn）行係統聲光報警。應安裝一套（tào）能指（zhǐ）示和確認實驗室壓差、適用而可視的氣壓監測裝置，其顯示部分安裝在外（wài）更衣室（shì）的進口處（chù）。
實驗區的供氣要通過一個（gè）HEPA過濾處（chù）理，排氣要通過串連的2個HEPA過濾處理。空（kōng）氣向高空排放，遠（yuǎn）離進氣口。為了（le）縮短工作管道潛（qián）在的汙染，HEPA盡可能安裝在靠近工作的地方。所有HEPA每年均須檢（jiǎn）測一次，同時（shí）在靠近HEPA的（de）地（dì）方應安裝零泄露氣（qì）密閥，便於過濾器安裝與消毒更（gèng）換。HEPA上遊安裝（zhuāng）預過濾器可延長其使用壽命。
防護服型生物安全Ⅳ級（jí）實驗室（shì）設計和運轉要（yào）求是指令性的。實驗室必須經過檢測（cè）、鑒定（dìng）和驗收（shōu）。隻有合乎（hū）設計（jì）要求（qiú）和（hé）運行標準的才能（néng）啟用。實驗室的驗收或年檢應參考（kǎo）ISO10648標準檢測方法進行（háng）密封（fēng）性測試，其檢測壓力不低於500Pa，半小時內的小時（shí）泄漏率不超過（guò）10%，以保證維護結構的（de）可靠性（xìng）。實驗室（shì）每年必須檢測一次，確認合乎設計和運行參數的要（yào）求（qiú），才能繼續運行（háng）。實驗室內外應有適合的通訊設施（、傳真、計算機等（děng）），進行無紙化操作。