三級生物安全實驗室要求規範

按照BSL-3標準建造（zào）的實驗室，也稱為生物安全實驗室。實驗室需與（yǔ）建（jiàn）築物中的一般區域隔離。其具體標準微（wēi）生物（wù）操作、特殊操作、安全設備、實驗（yàn）室設施（shī）要求如下。
1、標準操作
完成傳染（rǎn）性材料操作後，對手套進行消毒衝洗，離開實驗室之前，脫掉手（shǒu）套並洗（xǐ）手。設（shè）施內禁止吃、喝、抽煙，不準觸摸隱形眼鏡和使用化（huà）妝品。戴隱形眼鏡的人也要佩戴（dài）防（fáng）護鏡或麵罩。食物隻能存放在（zài）工作（zuò）區以外的地方。禁止用嘴吸取試驗液體，要使用的移液管。一切（qiē）操作均要小心，以減少和避免產生氣溶（róng）膠（jiāo）。實驗室衛生至少每天清（qīng）潔一次，工作後隨時消毒（dú）工作台（tái）麵，傳染性材料外（wài）溢、濺出汙染時要立即（jí）消毒處理。所有培養物、儲存物和其它日常廢棄物在處理之前都要用高壓滅菌器進行有（yǒu）效地滅菌處理。需要在實驗室外麵處（chù）理的材料，要裝入牢（láo）固不漏的容器內，加蓋密封後傳出實驗室（shì）。實驗室的廢棄物在送到（dào）處（chù）理（lǐ）地點之前應消毒（dú）、包裝（zhuāng），避免汙染環境。對BSL-3內操作的菌、毒種必須由兩人保（bǎo）管，保存在安全可靠的設施內，使用前應辦理批準手（shǒu）續，說明使用劑量，並詳細登記，兩人同時到（dào）場方能（néng）取出。試驗要有詳細使用和銷毀（huǐ）記錄。昆（kūn）蟲（chóng）和齧齒類動（dòng）物控製應參照其它（tā）有（yǒu）關（guān）規定（dìng）執行。
2、特（tè）殊操作
（1）製定安全細則
實驗室負責人（rén）要根據實際情況製定本實驗（yàn）室特殊而全麵的生物安全規則和具體的操作規（guī）程，以補充和細（xì）化本規範的操作要求，並報請生物安全委員會批準。工作人（rén）員必須了解細則，認真貫徹執行。
（2）生物危害標誌
要在實（shí）驗室入口的門上標記通用生物危害標誌。實驗室門口標記實驗微生物種類、實驗室負責人的名單和，指明進入本實驗室（shì）的特殊要求，諸如需要免（miǎn）疫接（jiē）種（zhǒng）、佩戴防護麵具或（huò）其它個（gè）人防護器具等（děng）。實驗室使（shǐ）用期間，謝*關人員參觀。如參觀必須（xū）經過批（pī）準並在個體（tǐ）條件和防（fáng）護達到要（yào）求時方能進入。
（3）生物危害警告
實驗過程中實驗室或物（wù）理防護設（shè）備裏（lǐ）放有傳（chuán）染性材料或感染動物時，實驗室的門（mén）必須保持緊閉（bì），無關人員一律不得進入。門口要示以危害警告標誌，如掛紅牌或文字說明實驗的狀態，禁（jìn）止進入或（huò）靠近。
（4）進（jìn）入實驗室（shì）的條件
實驗室負責人要、控製或禁止進入實驗室的（de）實驗人（rén）員和輔助人員。未成年人不（bú）允許進入實驗室（shì）。受感染概率增加或感染後果嚴重的實驗室工作人員不允許進入實驗（yàn）室。隻有了解實驗（yàn）室（shì）潛在的生物危害和特殊要（yào）求並能遵守有關規（guī）定合乎條件的人才能進入實驗（yàn）室。與工作無關的（de）動植物和其（qí）它物品不（bú）允許帶入實驗室。
（5）工作人員的培訓
對實驗室工作人員和輔助人員要進行與工作有關的定期和不（bú）定期的生物安全防護專業培訓。實驗人員需經專門生（shēng）物專（zhuān）業訓練和生物安全訓練，並由有經驗的（de）專家指導，或在生物安全（quán）委員會指導監（jiān）督下工（gōng）作。必須學會氣溶膠暴露危害的評價（jià）和預防方法。在（zài）BSL-3實驗室做傳染性工作之（zhī）前（qián），實驗（yàn）室負責人要保證和證明，所有工作人員熟（shú）練掌握了微生物標準操作和特（tè）殊操作，熟練掌（zhǎng）握本實驗室設備、設施的特殊操作運轉技術。包括操作致病因子和細胞培養的技能，或實驗室負責人特殊培訓的內（nèi）容，或包括在安全微生（shēng）物工作方麵（miàn）具有豐富經驗（yàn）的專家和安全委員會指（zhǐ）導下規定的（de）內容。避（bì）免氣溶（róng）膠暴露：一切傳染（rǎn）性材料的操作不可（kě）直接暴露於空氣之中，不能在開放的台麵上和開放的容器內進行，都應在生物安全櫃內或其它物理防護設備內進行。需要保護人體和樣品的操作可在室內排放式2A型生物安全櫃（guì）內進行。隻保護人體不保護樣品的操作可在Ⅰ級生物安（ān）全（quán）櫃內進行。如果操作帶有放射性或化學性有（yǒu）害物（wù）時應在2B2型生物安全櫃。禁止使用超淨工作台。
（6）避免利器的感染
對（duì）可能汙染的利器，包括針頭、注射器、刀片、玻璃片、吸管、毛細吸管和解剖刀等，必須經常地采取高度有效的防範措施，必須預防經皮膚的實（shí）驗室感染。在BSL-3實（shí）驗室工作，盡量不（bú）使用針頭、注射器（qì）和其它銳利的器件。隻有（yǒu）在必要時，如實質器官的注射、靜脈切開、或從動物體內和瓶子（密封膠蓋）裏吸取液體時才能使用,盡量用塑料製品代替玻璃製（zhì）品。在注射和抽取傳染性材料時，使用一次性注射器（針頭與注射器一體的）。使用過的（de）針頭在消毒之前避免（miǎn）不必要的（de）操作，如不可折彎、折斷、破損（sǔn），不要用手直接蓋上原來的針頭帽；要小心地把其放在固定方（fāng）便且不會刺破的處理利器的容器裏，然後（hòu）進（jìn）行高壓消毒（dú）滅菌。破損的玻璃不能用手直接操作（zuò），必須用機械的方法清除，如刷子、夾子和鑷子等。
（7）汙染的清除和消毒
傳染性材料操作完成之後，實驗室設備和工作台麵應用有效的消毒劑（jì）進行常規消毒，特別（bié）是傳（chuán）染材料溢出、濺出其（qí）它汙染，更要及時消毒（dú）。濺出的傳染性材料的消毒由（yóu）適合的專業人員處理和清除，或（huò）由其它經過訓練和有使用高濃度傳染物工（gōng）作經驗（yàn）的人處理。一切（qiē）廢棄物處（chù）理之前都要高壓滅菌，一切潛在的實驗室汙物（如，手套（tào）、工作服等）均需在處理或丟（diū）棄之前消毒。需要修理、維護的儀器，在包裝運輸（shū）之前要（yào）進行消毒。
（8）感（gǎn）染性樣品的儲藏運輸
一切感染性樣品如培養物、組織材料和體液樣（yàng）品等在儲藏、搬（bān）動、運（yùn）輸過程中都（dōu）要放在不泄漏的容器內,容器外表麵要*消毒，包裝要有明（míng）顯、牢（láo）固的標記。
（9）病原（yuán）體痕跡的監測
采集所有實驗（yàn）室工作人員（yuán）和其他有關人員的本底血清樣品，進行（háng）病原體痕跡跟蹤檢測。依（yī）據被操作病原體和設施功能情況或（huò）實際中發生的事件，定期、不（bú）定期采集血清樣本，進行特異性檢測。
（10）醫療監督與保健
在BSL-3實（shí）驗室工作期間對工作者進（jìn）行醫療監督和保健，對於實驗（yàn）室操作的病原體，工作人（rén）員要接受相應的試驗或免疫接種（如（rú）狂犬病疫苗，TB皮膚試驗）。
（11）暴露（lù）事故的處理
當生物安全櫃或實（shí）驗室出現持續正壓時，室內人員應立即（jí）停止操作並戴上（shàng）防護麵具，采取措施恢複負壓。如不能及時恢複和保持負壓，應停止實驗（yàn），及早按規程退出。發生此類事故（gù）或具有傳染性暴露（lù）潛在危險的其它事故和汙染，當事者除了采取緊急（jí）措（cuò）施外，應立（lì）即向實驗室負責（zé）人報告，聽候指（zhǐ）示，同時報告國（guó）家獸醫實驗室生物（wù）安全（quán）管理委員會。負責人和當事（shì）人應對其事故進行緊急科學、合理的處理。事後，當事人和負責（zé）人應提供切合實際的醫學（xué）危害評價，進行醫療監督和預防治療。實驗室負（fù）責人對事件的過程要予以調查和公布，寫出書麵報告呈報（bào）國家獸醫實驗室生物安（ān）全管（guǎn）理委員會同時抄報實驗室安全（quán）委員會並保（bǎo）留備份。
3、安全設備（初級防護屏障）
（1）防護服裝
實驗室內，工作人員要穿防（fáng）護性實驗服，如長（zhǎng）服裝、短套裝，或有護胸的工作服（fú）裝。消毒後清洗，如有明顯的汙染應及時換掉，作為（wéi）汙棄物處理。在實驗室外麵不能穿工作服。
（2）防（fáng）護手套
在操作傳（chuán）染（rǎn）性材料、感染（rǎn）動物和汙染的儀器時（shí）必須戴手套，戴雙層為好，必要時再戴上不易（yì）損壞的防護手套。更換手套前，戴在手上消毒衝洗，一次性手套不得重複使用（yòng）。
（3）生物安全櫃
感（gǎn）染性材料（liào）的操（cāo）作，如感染動物的解剖，組織培養、雞胚接種、動物（wù）體液的收取（qǔ）等，都應在（zài）Ⅱ級以上生物安全櫃（guì）內進行。離心、粉碎、攪（jiǎo）拌等不能（néng）在Ⅱ級生物安全櫃內進行的工作可在較大或（huò）特製的Ⅰ級生物（wù）安全櫃（guì）內進行。
（4）其（qí）它物理防護
當操作不能在生物安全櫃（guì）內進行時（shí），個人防護（Ⅲ級以上類似（sì）防護（hù）設備的具體要求）和其它物（wù）理防護設備（離心機安全帽，或密（mì）封離心機（jī）轉頭）並用（yòng）。
（5）麵部保護
汙染區、半汙染區應備有防護麵具以便（biàn）緊急使用，當房間內有感染動物時要戴麵具保護。建立緊急（jí）防護工作（zuò）點。
（6）緊（jǐn）急防護（hù）用品
汙染區或半汙染區備用防護麵具、衝洗眼睛的器具和藥品等（děng），隨時可用。
4、實驗室設施（次級防護屏障）
BSL-3生物（wù）安全實驗室裏所有病原微（wēi）生（shēng）物的操作均在Ⅱ級以（yǐ）上（含Ⅱ級）生物安全櫃內進行，其次級屏障（zhàng）標準如下：
（1）建築結構和平麵布局
建築物抗震能力（lì）七級（jí）以上，防（fáng）鼠、防蟲、防盜。實驗室內淨高應在2.6米以上，管道層淨高宜不低於2.0米。建築物內實驗室應與活動不受限製的公共區域隔開，設置安全門並安（ān）裝（zhuāng）門鎖，禁止無關人員進入。進入設施（shī）的通道設帶閉門器的雙扇門,其後是更衣室，分成一更室（清潔區）和二（èr）更室（半汙染（rǎn）區），二更室後麵為後室（shì）或稱緩衝室（半汙染區），進出緩衝室的門應為自動互鎖。如果是多個（gè）實驗室共（gòng）用一（yī）個公用的（de）走廊（láng）（或緩衝室（shì）），則進（jìn）入（rù）每個實驗室宜經過（guò）一個連鎖的氣閘（鎖（suǒ））門（mén）。實驗室應有（yǒu）安全通道和緊急出口，並（bìng）有明顯（xiǎn）標識。半汙（wū）染區與清潔區之間必須（xū）設置傳遞窗。洗刷室、機房等附屬區域應是清潔區，但（dàn）應（yīng）盡量縮短與實驗室的距離，方便工作。實驗室內可設密閉觀察窗。
（2）密閉性和內表麵
一切設施、設備外表無毛刺、無銳利棱角，盡量減少水平表麵麵積，便於（yú）清潔和消毒。各種管道通過的孔洞必須密封。牆和頂棚的表（biǎo）麵要光滑，不刺眼、不積塵、不（bú）受化學物和常用消毒劑的腐蝕（shí），無滲水（shuǐ）、不凝集蒸氣。地表麵應該是一體、防滑、耐磨、耐腐、不反光、不積塵、不漏水，如能按汙染區劃分給予顏色區別更好。工作台麵不能滲水，耐中等熱、有機溶（róng）劑、酸、堿和常用消毒劑的（de）損害和腐蝕。實驗室必要（yào）的桌椅櫥櫃等用具事先設計，便於穩妥安（ān）放（fàng）和使用，彼此留有一定空間便於清潔衛生，表麵消毒方便、耐腐。
（3）消毒滅菌設施
必須安裝雙扉式高壓蒸汽滅菌器，安裝在半汙染區與洗刷室之間（jiān）。滅菌器的兩個（gè）門應互為連鎖，滅（miè）菌器應滿足生物安全二次滅菌要求。汙染區、半汙染區（qū）的房間或傳遞窗內可安裝紫（zǐ）外燈。室內應配製人工（gōng）或自動消毒器具（如消毒噴霧器、臭氧消毒器）並（bìng）備有足夠的消毒劑。一切（qiē）實驗室內的廢（fèi）棄物都要分類集中裝在可靠的容器內，都要在設施內進行（háng）消毒處理（高壓、化學（xué）、焚化、其它（tā）處理（lǐ）），儀器的消毒選擇適當的（de）方法，如（rú）傳遞式臭（chòu）氧消毒櫃、環氧乙烷消毒袋等，如果廢棄物需要傳至實驗室（shì）外，應該消毒後並裝（zhuāng）入密封容器、包裝。
（4）淨化空調
實（shí）驗室汙（wū）染區和半汙染區采用負壓（yā）單向流全新風淨化（huà）空調係統。汙染區和半汙染區不允許安裝暖氣、分體空（kōng）調，不可用電風扇。溫度（dù）230C±20C、相對濕度40%—70%。室內（nèi）噪聲不超（chāo）過60分（fèn）貝。氣流方向始（shǐ）終保證由清潔區流（liú）向汙染區（qū），由低汙染區流向高汙染區。空調係統應（yīng）安裝壓力無關裝（zhuāng）置，以保證係統壓力平衡（héng），排風應采用一用一備自動切換係統。發生（shēng）緊急情況時，應關閉送風係統（tǒng），維持排風（fēng），保證實驗室內安全負壓。供氣需經HEPA過濾。排出的氣體必須經過至少兩級（jí）HEPA過濾排放，不允許在任何區域循環使用（yòng）。
室內（nèi）潔（jié）淨度高於萬級。實（shí）驗室送風口應在一（yī）側的棚頂，出風口應在對麵牆體的下部，盡量減少室內氣流（liú）死角。保（bǎo）持單向氣流，矢流方式較（jiào）為（wéi）合適。實驗室門口安裝可視裝置，能夠確（què）切表明進入實（shí）驗（yàn）室的氣流方向。Ⅱ級生物安全櫃每年檢（jiǎn）測一（yī）次。2A型的排氣可進入室內，2B2型安全櫃和Ⅲ級安（ān）全櫃的（de）排風要通過實驗室總排風係統（tǒng）排出。如果Ⅲ級安（ān）全櫃是帶有二次HEPA過濾、移動式，氣流亦可（kě）在室內（nèi）排氣（qì），但排氣口應（yīng）靠近（jìn）室內排風口。如有其它設備如液體消毒傳遞窗、藥物熏蒸消毒器等的抽氣係統（tǒng），必須經過HEPA過濾，並根據需要更換。
水的淨化處理每個房間出口附近設（shè）置一個（gè）非手動開（kāi）關的洗手池。汙染（rǎn）區、半汙染區和有可能被汙（wū）染的供水管（guǎn）道應采（cǎi）取防（fáng）止回流措施。如（rú）有下水，水池或（huò）地漏要（yào）設置消毒設施。下水下方必須設（shè）有水（shuǐ）封（fēng），並始終充+盈消毒劑，水封的排氣應加HEPA過濾裝置。可能汙染的下水隻能排放到消毒裝置內，消毒後再排至公共下水道。如沒有下水排放，或不外排的所有廢水均須收集並高壓處（chù）理。潔淨區域的下水可直接排入公共下水道。
（5）汙染物和廢棄物處理
對可能汙染（rǎn）的物品和其它廢棄（qì）物要放在的防止汙染擴散或可消毒的容器裏，以便消毒或高壓滅菌（jun1）處理。
（6）實驗室監（jiān）控（kòng）係統
應對（duì）實驗室各種狀態及設施全麵設置監控報警點，構成完善的實驗室安全報（bào）警係統。備用（yòng）電源非雙路供電情（qíng）況下，應配有備用電源（yuán），在停電時，至少能夠保證空調係統、警鈴、燈光、進出控製和生（shēng）物安全設備的工作。
（7）照明
照明應（yīng）適合室內的一切活動，不反射、不刺眼，不影響視線（xiàn）。照明燈把燈具的部（bù）件裝在頂棚（péng）裏（lǐ），或采取減少積塵措施。
（8）通訊
實（shí）驗室內外應（yīng）有（yǒu）適合的通訊設施（、傳真、計算機等），進（jìn）行（háng）無紙化（huà）操（cāo）作。驗收和年檢BSL-3設施（shī）和運行（háng）必須是（shì）指（zhǐ）令性的。實驗室的（de）驗收或年檢應參考ISO10648標準檢測方法進行密封性測試，其檢測壓力（lì）不低於250Pa，半小時的小時泄（xiè）漏率不超過10%，以保證維護結構（gòu）的可靠性。新建（jiàn）設施的功（gōng）能必須檢測驗收，確認設計（jì）和運作參數合乎要求方能（néng）使用（yòng）。運行後每年再進行一次檢測確認。