
無菌室也(yě)稱接種室,是係統(tǒng)接種、純化菌種(zhǒng)等無菌操作的實(shí)驗室(shì)。在微生物工作中(zhōng),菌種的接種移植是一項主要操作,這項操作的特點就是要保證菌種純(chún)種,防(fáng)止雜菌(jun1)的汙染。在一般環境的空氣中,由於存在許(xǔ)多塵埃和雜菌,很易造成汙染,對接種工作幹擾很大(dà)。
無菌室的(de)設置應(yīng)根據既(jì)經(jīng)濟(jì)又科學的原則來設置。其基本要求有以(yǐ)下幾點:
(1)無菌(jun1)室(shì)應有(yǒu)內、外兩間(jiān),內間是無(wú)菌(jun1)室,外間是緩衝室。房間(jiān)容積不(bú)宜過大(dà),以便於空氣滅菌。內間(jiān)麵積2×2.5=5m2,外間麵積1×2=2m2,高以2.5m以下(xià)為宜,都應有天花板。
(2)內間應當設拉門,以減少空氣的(de)波動,門(mén)應設在離工作台zui遠的位置(zhì)上;外間的門也用拉門,要設在距內間(jiān)zui遠的位(wèi)置上。
(3)在分隔內間與外(wài)間的牆壁或“隔扇”上,應(yīng)開一(yī)個小窗(chuāng),作(zuò)接種過(guò)程中必要的內外傳(chuán)遞物品的通道,以減少人員進出內間的次數,降(jiàng)低汙染程度。小窗寬60cm、高40cm、厚30cm,內外都掛對拉的窗扇。
(4)無菌室容積小而嚴密,使用一段(duàn)時間後,室內溫度很高,故應設置通氣窗。通氣窗應設在內室進門處的頂棚上(即離工作台zui遠的位置),為雙層(céng)結(jié)構,外層(céng)為(wéi)百葉窗,內層可用抽(chōu)板式窗扇。通氣窗可在內室使用(yòng)後、滅菌前開啟,以流通空氣。有條件(jiàn)可安裝恒溫(wēn)恒濕機。
無菌室內設備和(hé)用具:
(1)無菌室內的工(gōng)作台,不(bú)論是什麽(me)材質、用途的,都要求表麵光滑和台(tái)麵水平。
(2)在內(nèi)室和外室各安(ān)裝一個紫外燈(多為(wéi)30W)。內室(shì)的紫外線燈應(yīng)安裝在經常工作的座位正(zhèng)上方,離地麵2m,外室的紫外線(xiàn)燈可安裝在外室中(zhōng)央。
(3)外室應有的工作服、鞋、帽、口罩(zhào)、盛有來蘇兒水(shuǐ)的瓷盆和毛巾、手持噴霧器和(hé)5%石炭酸溶液等。
(4)內室應有酒精燈、常用接種工(gōng)具、不鏽鋼製的(de)刀、剪、鑷子、70%的酒精棉(mián)球、工業酒精、載玻(bō)璃片、特種蠟筆(bǐ)、記錄本、鉛筆、標簽紙(zhǐ)、膠水、廢物筐等。
無菌室的滅菌消毒:
(1)薰(xūn)蒸:這是無菌(jun1)室*滅(miè)菌的措施。無菌室使用了較長時間,汙(wū)染比較嚴重時,應進行(háng)薰蒸滅(miè)菌。可用(yòng)甲(jiǎ)醛、乳酸(suān)或硫磺薰蒸。
(2)噴霧:在每次使用無菌室前進行。噴(pēn)霧可促使空氣中(zhōng)微(wēi)粒及微生物沉降,防止桌麵、地麵上的微塵飛場,並(bìng)有殺菌(jun1)作用。可用5%石炭酸噴(pēn)霧。
(3)紫外線照射(shè):在每次使用無菌室前進行。紫外線有較好(hǎo)的殺菌效果(guǒ)。通常應開啟紫(zǐ)外線(xiàn)燈照射30~60min。
無菌(jun1)室工作規程:
(1)無菌室滅菌。每次使用前開啟紫外線燈照射30min以上,或在使用前30min,對內外室用5%石炭酸噴霧。
(2)用肥皂洗手後,把所需器材搬入外室(shì);在外室換上已滅菌的工作服(fú)、工作帽和(hé)工作鞋,戴好口罩,然後用2%煤酚皂(zào)液將手浸洗2分鍾。
(3)將各種需用物品搬進內室清點、就位,用5%石炭酸在工作台(tái)麵上(shàng)方和操作員(yuán)站位空間噴霧,返回外室,5~10min後再(zài)進內室工作。
(4)接種操作前,用70%酒精(jīng)棉球擦手;進行無菌操作時,動作要輕緩,盡量減少空氣波動和地(dì)麵揚塵。
(5)工作中應注意安(ān)全。如遇棉塞著火(huǒ),用手緊握或用濕布包裹熄滅,切勿用嘴吹,以免擴大燃燒;如遇有菌培養物灑落或打碎有菌容器時,應用浸潤5%石炭酸的抹布包裹後,並用浸潤5%石炭酸的抹布擦拭(shì)台麵或地麵,用酒精棉球擦手後再繼續操(cāo)作。
(6)工作結束,立即將台麵收拾(shí)幹淨,將不應在無(wú)菌室存放的(de)物品和廢棄物全部拿出(chū)無菌室(shì)後,對無菌室用5%石炭酸噴霧,或開紫(zǐ)外線燈照射30min。