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一、目的
本規程旨在為無菌操作及無菌室的保護提供一個標準化規（guī）程。
二、適用範圍
微生物檢測實驗室
三、責任者 QC主管生測員
四、安全注意事（shì）項
嚴格無（wú）菌操作，防止微生物汙染；操作人員進入無菌室應先關掉紫外燈（dēng）。
五、建（jiàn）造規程
1、無菌室應設（shè）有（yǒu）無菌操作間和緩衝間，無菌操作間（jiān）潔淨度應達（dá）到10000級，室（shì）內溫度保持在20-24℃，濕度保持（chí）在45-60%。超淨台潔淨度應（yīng）達到100級。
2、無菌室應保（bǎo）持清潔，嚴禁堆放雜物，以防汙染。
3、嚴防一切滅菌器材和培養基（jī）汙染，已汙染者應停止使用。
4、無菌室應備有（yǒu）工作濃度的消毒液，如5％的甲酚溶液，70％的酒精，0.1％的新潔爾滅溶液，等等（děng）。
5、無菌室應定期用適宜的消（xiāo）毒液滅菌清潔，以保證無菌室的潔淨度符合要求。
6、需要帶入無菌室（shì）使用（yòng）的儀器，器械，平皿等一切物品，均應包紮嚴密，並應經過（guò）適宜（yí）的方法滅菌。
7、工作人員進入無菌室前，必須用肥皂或消毒（dú）液（yè）洗手消毒，然後在緩衝（chōng）間更換工作服，鞋（xié），帽子，口罩和手套(或用70%的乙醇（chún）再次擦拭（shì）雙手)，方可進入無菌（jun1）室進行操作。
8、無菌室使用前必須打開無（wú）菌室（shì）的紫外（wài）燈輻照滅菌30分鍾（zhōng）以上，並且同時（shí）打開超淨台進行吹風。操作完（wán）畢，應及（jí）時清理無菌室（shì），再用紫（zǐ）外燈輻照滅菌20分（fèn）鍾。
9、供試品在檢查前，應保持外包裝完整，不得開啟，以防汙染。檢查前，用70％的酒精棉球消毒外表麵。
10、每次操作（zuò）過程中，均應做陰性對照，以檢（jiǎn）查無菌操作的可（kě）靠性。
11、吸取（qǔ）菌液時（shí），必須（xū）用吸耳球吸取，切勿直接用口接觸吸管（guǎn）。
12、接種針（zhēn）每次使（shǐ）用前後，必須通過火焰灼燒滅（miè）菌，待冷卻後，方可接種培養物。
13、帶（dài）有菌液的吸管，試管（guǎn），培養皿等器皿應浸泡在盛有5%來蘇爾溶液的（de）消毒桶內消毒，24小時後取出（chū）衝洗。
14、如有菌液灑在桌上或地上，應立即用5%石碳（tàn）酸溶（róng）液或3％的來（lái）蘇爾傾覆在被汙染處至少30分鍾，再做處理。工作衣帽等受到菌液汙染時，應立即脫去，高壓（yā）蒸汽滅（miè）菌後洗滌。
15、凡（fán）帶有（yǒu）活菌的物品，必須經（jīng）消毒後，才能在水下衝洗，嚴禁汙（wū）染下（xià）水（shuǐ）道。
16、無菌室應每月檢查菌落數。在超淨（jìng）工作台開啟的狀態下，取（qǔ）內徑90mm的無菌培養皿若幹（gàn），無菌操作分別注入融化並冷卻至約（yuē）45℃的營養瓊（qióng）脂培養基約15ml，放至凝（níng）固後（hòu），倒置於30～35℃培養（yǎng）箱（xiāng）培養48小時，證（zhèng）明無菌後，取平（píng）板3～5個，分別放置工作位置的左（zuǒ）中右等處（chù），開（kāi）蓋暴露30分鍾後，倒置於30～35℃培養箱培養48小時，取（qǔ）出（chū）檢查。100級潔淨區平板雜（zá）菌數平均不得超過1個菌落（luò），10000級潔（jié）淨室平均不得超（chāo）過3個菌落。如超過限度，應對無菌（jun1）室進（jìn）行*消毒，直至重複檢查合乎要求為止。
六、參照 《藥品衛（wèi）生檢驗方法》 《中國藥品檢驗標準操作規範》中 (無菌檢（jiǎn）查法)章節 中華人民共和國醫藥行業標（biāo）準 YY/T0188.6-1995《藥（yào）品檢驗（yàn）操作規程》
七、適用部門
質量管理（lǐ）部
八、無菌室技術指導說明（míng）
在獲得了無（wú）菌環境和無菌材料後，我們還要保（bǎo）持無菌狀態，才能對某種特定的已知微生物進行研究或利用它們的功能，否則外界的各種微生物很容易混入。外界不相幹的微生物混入的現象，在（zài）微生（shēng）物學中我們叫做汙染雜菌（jun1）。防止汙染是微（wēi）生（shēng）物學工（gōng）作中十分（fèn）關鍵的技術。一方麵是*滅菌，另一方麵防止汙染，是無菌技術的兩個方（fāng）麵。另外，我們還要防止（zhǐ）所研（yán）究的微生物，特別是致病微（wēi）生物或經過（guò）基因工程改造了（le）的本來自然界不存在的微生（shēng）物從我們的實驗容器中逃逸到外（wài）界（jiè）環（huán）境中去。為了這些目的，在微生物學中，有許多措施。
無菌室一般是在微生物實驗室內專辟一個小房間。選（xuǎn）用（yòng）彩鋼板及鋼化玻璃建造。麵積不宜過大，約5-20平方米即可，高2.5米（mǐ）左右。無菌（jun1）室外要（yào）設（shè）一個緩衝間，緩衝間的門和無菌室的門不要朝向同一方向，以免氣流帶進雜菌。無（wú）菌室和緩衝間都必須密閉。室內裝備的換氣設備必須有空（kōng）氣過濾裝置。無菌室內的地（dì）麵、牆壁必須平整，不易（yì）藏汙納垢，便於清洗。工（gōng）作台的台麵應該處於水（shuǐ）平狀態。無（wú）菌室和緩衝間都裝有（yǒu）紫外線燈，無菌室的紫外（wài）線燈距離工（gōng）作台麵1米。工作人員進入無菌室應穿滅過菌的服裝，戴帽子。
當前（qián）無菌室多存在於微生物工廠，一般實驗室（shì）則使用（yòng）超淨台（tái）。超（chāo）淨（jìng）台其主要功（gōng）能是利用空氣層流裝（zhuāng）置排除工作台麵上部包括微生物在內的各種微小塵埃。通過電動裝置使空氣通過過濾器具後進入工作台麵，使台麵始終保持在流動無菌空氣控製之下。而且在接近（jìn）外部的一（yī）方有一道高速流（liú）動的氣簾防止外部帶菌空（kōng）氣（qì）進（jìn）入。
當前位置：